技術(shù)概述
蛋白-蛋白相互作用是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究中最重要的方面之一。GST pulldown實(shí)驗(yàn)是一個有效驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù)。將靶蛋白與GST（谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶）融合表達(dá)，并將靶蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)親和樹脂上，作為與目的蛋白親和的支撐物，充當(dāng)“誘餌蛋白”，目的蛋白溶液過柱，可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”（目的蛋白），洗脫結(jié)合物通過SDS-PAGE電泳分離，或聯(lián)用WB和MS檢測，可驗(yàn)證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應(yīng)的目的蛋白，從而證實(shí)兩種蛋白間的相互作用或篩選相應(yīng)的目的蛋白。
“誘餌蛋白”和”捕獲蛋白”均可通過細(xì)胞裂解物、純化的蛋白、表達(dá)系統(tǒng)以及體外轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)等方法獲得。此方法簡單易行，操作方便。
（資料來源：金開瑞生物，聚生物整理）
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（XXX編輯，XXX修善）
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免疫共沉淀和GST pull down技術(shù)各有何優(yōu)勢