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TA克隆
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技術(shù)待認(rèn)領(lǐng)

技術(shù)概述

TA克隆(TA cloing)是一種將PCR產(chǎn)物直接連接到T克隆載體的方法。TA克隆技術(shù)是利用了Taq聚合酶具有末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)活性,但卻不具有3’-5’端外切酶校準(zhǔn)活性的特點(diǎn),可在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個(gè)非模板依賴的dA。T載體是一種帶有3’-dT突出端的載體,在連接酶的作用下,能高效的與PCR產(chǎn)物連接,極大地提高克隆的效率。

通過(guò)PCR的方法擴(kuò)增目的基因片斷的過(guò)程中,由于往往不清楚目的基因的DNA序列,獲得的目的片斷通常需要通過(guò)TA克隆的方法,重組到T-載體中,通過(guò)載體上通用引物測(cè)定DNA序列。TA克隆是目前克隆PCR產(chǎn)物最簡(jiǎn)便、快捷的方法。

(資料來(lái)源:轉(zhuǎn)導(dǎo)生物實(shí)驗(yàn)室,美吉生物)

技術(shù)詳情

(XXX編輯,XXX修善)

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