技術(shù)概述
致癌試驗(yàn),是檢驗(yàn)外來環(huán)境因素或化合物及其代謝物是否具有誘發(fā)癌或腫瘤(包括惡性腫瘤(癌)和良性腫瘤)作用的試驗(yàn)。能誘發(fā)惡性或良性腫瘤的物質(zhì),稱為致癌物。
致癌試驗(yàn)一般可分為短期快速篩檢法和長(zhǎng)期致癌試驗(yàn)。
1. 短期快速篩檢法
較常用方法如下:
(1)致突變?cè)囼?yàn)法:在許多致突變?cè)囼?yàn)方法中,艾姆斯法(Ames test)最為常用,其理論根據(jù)為體細(xì)胞突變是致癌作用的基礎(chǔ)。根據(jù)艾姆斯法試驗(yàn)結(jié)果,證實(shí)至少有80%的已知致癌物具有致突變作用,但也有不致突變的致癌物(如石棉纖維)和不致癌的致突變物。由于本法簡(jiǎn)便、靈敏,結(jié)果較為可靠,是目前最普遍使用的一種致癌物快速篩檢法。
(2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外轉(zhuǎn)化試驗(yàn):將哺乳動(dòng)物細(xì)胞株于體外與受試物接觸,如受試物有致癌作用,可使正常細(xì)胞在形態(tài)與生理特性方面發(fā)生變化并與癌細(xì)胞相似。此種過程稱為轉(zhuǎn)化,已發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞稱為轉(zhuǎn)化細(xì)胞。細(xì)胞轉(zhuǎn)化并非形成腫瘤,但表示受試物可能具有致癌作用,并可用于致癌物的篩檢。根據(jù)目前經(jīng)驗(yàn)將艾姆斯試驗(yàn)與細(xì)胞體外轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)合使用,可篩檢出98%以上的致癌物。
(3)DNA修復(fù)合成試驗(yàn):常用方法有程序外DNA合成試驗(yàn)。DNA受損后,發(fā)生在正常復(fù)制合成期(S期)以外DNA的修復(fù)合成,稱為程序外DNA合成(UDS)或DNA修復(fù)合成。3H-胸苷(3H-dT)摻入量法,可以反映DNA修復(fù)合成情況:3H-dT可摻入正在復(fù)制的DNA分子中,使其帶有放射性標(biāo)記。將受試細(xì)胞分裂阻斷同步化于G1期,再用羥基脲抑制殘存的S期半保留DNA復(fù)制,放射自顯影法和液閃計(jì)數(shù)法確定3H-胸苷摻入量。
2.長(zhǎng)期致癌試驗(yàn)
多于哺乳動(dòng)物中進(jìn)行,一般多用大鼠、小鼠等嚙齒動(dòng)物,如條件許可,尚可于狗和猴等一種非嚙齒動(dòng)物中進(jìn)行。用完整哺乳動(dòng)物進(jìn)行的長(zhǎng)期致癌試驗(yàn)結(jié)果可靠,但試驗(yàn)過程較長(zhǎng),不能在較短時(shí)間內(nèi)得出結(jié)論,費(fèi)用也較高,故近年來有許多短期快速方法正在發(fā)展。
技術(shù)詳情
參考文獻(xiàn)
[1]高羚喻,吳純啟,廖明陽,王全軍.藥物中、短期致癌試驗(yàn)的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2011,9(03):231-233.
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