技術(shù)概述
細胞凋亡（Cell Apoptosis）是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用。
細胞凋亡檢測最常用的方法為AnnexinV/PI雙染法流式檢測，其原理為：磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）正常位于細胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面，AnnexinV是一種分子量為35-36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力特異性結(jié)合。將AnnexinV進行熒光素FITC（異硫氰酸熒光素）標記，以標記了的Annexin-V作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。
碘化丙啶（propidine iodide，PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，無法進入活細胞內(nèi)部，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。因此將Annexin V 與PI 匹配使用，就可以將凋亡早晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。
（資料來源：百度百科、愛普拜生物）
技術(shù)詳情
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